利用蓝藻生产蒎烯的方法

一、项目简介

本发明属于合成生物学与代谢工程领域,具体涉及一种利用基因工程改造的蓝藻作为微生物细胞工厂,以二氧化碳(CO)为碳源,在光能驱动下高效合成蒎烯的方法。蒎烯是一种重要的单萜类化合物,具有α和β两种构型,是生产高密度航空燃料(如JP-10)、香料、药物及精细化学品的关键前体。传统上,蒎烯主要从松节油中提取,存在成分复杂、分离纯化成本高、产物得率和纯度低等问题;而现有微生物异源合成策略多依赖大肠杆菌或酵母,需消耗粮食来源的糖类作为碳源,成本较高且不可持续。

针对上述问题,本发明以聚球藻Synechococcus elongatus PCC 7942为底盘菌,通过多维度代谢工程策略,构建了一条从CO到蒎烯的高效光合自养合成路线,产量达到6.14 mg/L,创下了光合法合成蒎烯的最高产量记录,为蒎烯的绿色、可持续生物制造提供了突破性技术方案。

二、专利摘要

本发明公开了一种利用蓝藻生产蒎烯的方法,包括以下步骤:(1)以蓝细菌聚球藻为底盘菌,过表达编码来源于北美冷杉的蒎烯合酶和香叶基焦磷酸合酶的基因,所述基因是根据蓝藻的密码子偏好性进行优化、去除质体定位的信号肽部分后的核苷酸序列;(2)过表达酵母来源的异戊烯基焦磷酸异构酶;(3)引入Ru5P途径关键酶RibB突变体。本发明构建的工程菌能够以CO2为碳源在光能驱动下通过发酵合成蒎烯,产量达到6.14mg/L,是目前光合法合成蒎烯的最高产量。

三、专利状态

本技术已递交中国专利申请,申请号:202311143206.5,实质审查中;持有人项目编号:SIPPE23-28。

四、持有单位

中国科学院分子植物科学卓越创新中心。

五、合作方式

转让、许可或合作研发。

六、联系方式

张雯,wzhang@cemps.ac.cn,021-54924138。