一、项目简介

本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种通过酶解法高效制备盐角草原生质体的方法。盐角草是一种高度耐盐的真盐生植物，具有重要的科学研究价值、经济价值和生态价值。然而，其细胞壁结构特殊，传统方法难以高效、高活性地制备其原生质体，这限制了在细胞水平对其进行遗传转化、基因功能等深入研究。

本发明的核心在于提供一种专用于盐角草的酶组合物及酶解液配方。该酶组合物包含纤维素酶、离析酶、蜗牛酶、半纤维素酶和果胶酶，并通过优化各酶组分的质量配比（如纤维素酶：离析酶：蜗牛酶：半纤维素酶：果胶酶为1：0.1-0.5：0.1-0.5：0.1-0.5：0.1-0.5），以及酶解液中的渗透压调节剂（如甘露醇或山梨醇，浓度需根据盐角草组织汁液的渗透势精确测定，例如针对肉质茎可能采用0.9–1.1 mol/L的山梨醇溶液）、缓冲体系（如MES，pH 5.5-6.0）和稳定剂（如牛血清白蛋白）等关键组分 。

应用该方法制备盐角草原生质体，流程包括材料预处理、酶解、过滤、离心和纯化等步骤。通过精确控制酶解条件（如温度25–27°C，时间4–6小时，避光低速震荡），本发明能够显著提高原生质体的产量和活力。所得原生质体碎片率低于10%，原生质体活率可达95%以上，为后续的瞬时转化、体细胞杂交等研究提供了高质量的实验材料 。

二、专利摘要

本发明公开了一种用于制备植物原生质体的酶组合物，由下述酶组成：纤维素酶R10，离析酶R10，蜗牛酶，半纤维素酶，果胶酶。包含该酶组合物的酶解液能够用于高效制备盐角草原生质体，产品碎片率低于10％，原生质体活率达到至少95％以上。

三、专利状态

本技术已递交中国专利申请，申请号：202410559036.7，实质审查中；持有人项目编号：SIPPE24-32。

四、持有单位

中国科学院分子植物科学卓越创新中心。

五、合作方式

转让、许可或合作研发。

六、联系方式

张雯，wzhang@cemps.ac.cn，021-54924138。